你好，我亲爱的朋友们。大锤哥已经来为亲爱的朋友们解答以上问题了。qpcr引物设计，mirna引物的设计原理很多人还不知道，现在我们下去吧！

1.miRNA引物设计(茎环法+染料法检测)设计方法:将miRNA最后6个碱基的反向互补序列加到通用茎环的后端作为反向引物，正向引物是miRNA最后6个碱基的序列，反向引物在茎环上。

2、逆转录茎环通用序列:gtcgtatccagtggttggagtccaattgcactggatacgmrna序列:> MMU-Mir-99 b-5 PMI matmus musculus Mir-99 b-5 pcccuccagaaccgaccuggmmu-Mir-99 b-5p逆转录颈环。引物:gtcgtatccaggtgcgtcgtggagtcgcaattgcactggatagaccgaag定量PCR反向引物:TGTCGTGGAGTCGGC正向引物:CACCCGTAGAACCGAC。

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